بررسی تأثیر استفاده از پپتید نشانه پروترومبین انسانی بر کارآیی ترشح فاکتور ۹ انسانی در رده سلولی hek۲۹۳t
Authors
abstract
هدف: بهطور عمده پروتئینهای یوکاریوتی دارای پپتید نشانه هستند که نه تنها نقش محوری در کارآیی ترشح دارند بلکه در بیان پروتئین نیز اهمیت دارند. فاکتور 9 انعقادی، گلیکوپروتئینی است که نقش محوری در مسیر انعقاد خون ایفا میکند. نقص یا کاهش تولید فاکتور 9 منجر به بیماری هموفیلی b می شود. در این پژوهش، با هدف افزایش و کارآیی ترشح پروتئین فاکتور 9، عملکرد پپتید نشانه پروترومبین انسانی در سامانه بیانی هترولوگ بررسی شد. به این منظور، کارآیی ترشح پپتیدهای نشانه ابتدا با برنامه های رایانه ای signalp و predisi و سپس بهصورت عملی ارزیابی شد. مواد و روش ها: با استفاده از روش های مولکولی، تکثیر پپتید نشانه پروترومبین انسانی و الحاق آن به بخش بالغ cdna فاکتور 9 انسانی انجام شد. سپس قطعه کایمریک حاصل در مقایسه با فاکتور 9 انسانی با پپتید نشانه بومی در رده سلولی hek293t تحت تنظیم پروموتر سیتومگالوویروس (cmv) در شرایط گذرا بهطور عملی آزمایش شد. با استفاده از نرم افزارهای پیشگویی کننده مبتنی بر الگوریتم شبکه های عصبی، امتیازی برای جایگاه برش و کارآیی ترشح پپتید نشانه پروترومبین انسانی و بومی فاکتور 9 ارزیابی شد. میزان فاکتور 9 بیان شده در محیط کشت سلول های نوترکیب با rt-pcr و الایزا بررسی شد. نتایج: بررسی های رایانه ای پیشگویی نمود که پپتید نشانه پروترومبین انسانی در مقایسه با پپتید نشانه بومی فاکتور 9 کارآمدتر است. این پیشگویی با استفاده از روش های rt-pcr و الایزا علیه rna کایمری و نیز پروتئین نوترکیب fix به ترتیب تأیید شد. نتیجه گیری: تحقیق حاضر نشان داد که پپتید نشانه پروترومبین انسانی نسبت به پپتید نشانه بومی پروتئین فاکتور 9از کارآیی بالا تری برخوردار است. این موضوع با پیش بینی های حاصل از برنامه های رایانه ای مطابقت دارد. نتیجه این جایگزینی می تواند در فاز بیان پایدار بررسی شود.
similar resources
استفاده از پپتید نشانه و پروپپتید پروترومبین خوکی به منظور افزایش کارایی بیان، ترشح و فعالیت زیستی فاکتور 9 انسانی در رده سلولی hek293
فاکتور 9 انسانی، نقش محوری در مسیر انعقاد خون ایفا می کند و متحمل چندین نوع تغییر پس از ترجمه می گردد، که در میان آنها گاماکربوکسیلاسیون برای فعالیت فاکتور 9 ضروری است. گزارشات قبلی نشان دادند که تعویض پروپپتید در پروتئین های وابسته به ویتامین k با پروپپتید پروترومبین انسانی که گرایش کمی به آنزیم گاماکربوکسیلاز دارد سبب افزایش گاماکربوکسیلاسیون در رده سلولی hek293 شد. این احتمال وجود دارد که پر...
بررسی میزان ترشح خارج سلولی پپتید ضد سرطان VEGF111b در سلول های انسانی HEK-293
سابقه و هدف: VEGF111b یک ایزوفرم جدید از فاکتورهای رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) است که اخیرا به عنوان یک داروی ضد سرطان مطرح شده است. هدف مطالعه حاضر بررسی میزان ترشح این پروتئین از دیواره سلول های HEK293 به منظور تولید تجاری این فاکتور نوترکیب است. مواد و روش ها: توالی VEGF111b توسط نرمافزار OLIGO و اطلاعات ژن بانک NCBI طراحی و داخل وکتور pBUD.cE4.1کلون شد. وکتور نوترکیب pBUD.VEGF111b با است...
full textکارآیی ترشح و گاماکربوکسیلاسیون فاکتور IX نوترکیب انسانی در سلول‌های پایدار دروزوفیلا
چکیده سابقه و هدف فاکتور IX طی بلوغ خود در کبد، نیازمند کربوکسیلاسیون اسیدآمینه‌های گلوتامیک در ناحیه گلا می‌باشد که در ترشح و فعالیت آن نقش دارد. با توجه به ناکارآمدی سیستم بیانی پستانداران در ترشح و گاماکربوکسیلاسیون کامل فاکتورهای انعقادی نوترکیب و فعالیت بالاتر آنزیم گاماکربوکسیلاز در سامانه دروزوفیلا (S2)، مطالعه حاضر با هدف بررسی قابلیت این سامانه در گاماکربوکسیلاسیون و لذا ترشح و فعالیت...
full textبررسی میزان ترشح خارج سلولی پپتید ضد سرطان vegf۱۱۱b در سلول های انسانی hek-۲۹۳
سابقه و هدف: vegf111b یک ایزوفرم جدید از فاکتورهای رشد اندوتلیال عروقی (vegf) است که اخیرا به عنوان یک داروی ضد سرطان مطرح شده است. هدف مطالعه حاضر بررسی میزان ترشح این پروتئین از دیواره سلول های hek293 به منظور تولید تجاری این فاکتور نوترکیب است. مواد و روش ها: توالی vegf111b توسط نرمافزار oligo و اطلاعات ژن بانک ncbi طراحی و داخل وکتور pbud.ce4.1کلون شد. وکتور نوترکیب pbud.vegf111b با است...
full textجداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO
جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری‌زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره‌باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور VII ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد....
full textبررسی اثر پپتید نشانه پروتئین لوسیفراز gaussia princeps بر بیان ترشحی فاکتور انعقادی ix انسانی دررده سلولی cho
افزایش کارآیی فرآیند ترشح بوسیله طراحی و یا انتخاب یک پپتید نشانه مناسب، می تواند به عنوان راهکاری جدید برای افزایش بیان پروتئین های نوترکیب در سامانه های بیانی هترولوگ مورد استفاده قرار گیرد. در ارتباط با بهینه سازی بیان فاکتور 9 انعقادی انسانی در رده های سلولی پستانداران، اثر پپتید نشانه های پروتئین های لوسیفراز از جاندار دریایی به نام gaussia princeps در مقایسه با عملکرد پپتید نشانه بومی فاک...
15 صفحه اولMy Resources
Save resource for easier access later
Journal title:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۸، شماره ۲، صفحات ۲۷-۳۹
Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023